Please activate JavaScript!
Please install Adobe Flash Player, click here for download
ePaper created 2017-09-20, 09:19:59 | version 1.38.0
implants_badania implants 8 3_2017 8 nych w Zakładzie Chirurgii Stomatologicznej Warszawskiego Uniwersytetu Medycznego. Próbki podzielono na 2 grupy. Grupa 1 (O) to całkowicie zatrzymane zęby 3. trzonowe usu- wane ze względów ortodontycznych u pacjen- tów bez jakichkolwiek objawów klinicznych i radiologicznych ostrego lub przewlekłego pro- cesu zapalnego. Liczebność tej grupy wynosiła n = 15. Grupa 2 (Z) to zęby usuwane z różnych wskazań w związku z brakiem możliwości dal- szego leczenia zachowawczego. Zębom tym mogły towarzyszyć przewlekłe lub ostre stany zapalne zębopochodne. Wykluczone były zęby uprzednio leczone endodontycznie i w związku z tym posiadające jakiekolwiek materiały wy- pełniające lub lecznicze w systemie komorowo- -korzeniowym. Liczebność w tej grupie wyno- siła n = 20. Przygotowanie próbek Każdy ząb był traktowany jako osobna próbka i nie miał styczności z inną próbką. Wszystkie próbki były preparowane bezpośred- nio po ekstrakcji z zachowaniem zasad aseptyki. W pierwszym etapie przepłukiwano je roztwo- rem soli fizjologicznej i oczyszczano ostrymi kiretami z resztek ozębnej. W grupie 2 wszel- kie ślady próchnicy czy materiału wypełniają- cych były usuwane za pomocą wierteł z nasy- pem diamentowym osadzonych na końcówkę turbinową. Po mechanicznym oczyszczeniu próbki ponownie były płukane roztworem soli fizjologicznej, a następnie suszone sprężonym powietrzem. Tak przygotowywany materiał był każdora- zowo wkładany do komory mielącej urządzenia Smart Dentin Grinder KometaBio (USA). Proces mielenia i sortowania materiału biologiczne- go przeprowadzano zgodnie ze wskazaniami producenta urządzenia. Pozyskany materiał odsypywano do dedykowanego sterylnego po- jemniczka i zalewano na 10 min załączonym w zestawie roztworem Dentin Cleanser Kometa Bio (USA) tak, aby nawilżyć i pokryć cały mate- riał powstały z mielenia i sortowania zęba. Po 10 min nadmiar roztworu odsączano za pomo- cą sterylnych gazików. W kolejnym etapie próbkę zalewano na 3 min dedykowanym roztworem Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline KometaBio (USA). Następnie, nadmiar płynu absorbowano za pomocą ste- rylnych gazików. Całkowity czas od ekstrakcji do przygotowania próbki nie przekraczał 15-20 min. Próbki bezpośrednio po przygotowaniu były w całości przenoszone do uprzednio przygoto- wanego podłoża hodowlanego i odsyłane celem badania mikrobiologicznego. Uzyskany w wyniku „mielenia” (mechanicz- nej homogenizacji) i opisanego powyżej pro- cesowania w celu autotransplantacji, zgodnie z protokołem prof. Bindermana materiał prze- noszono do 10 ml pożywki płynnej Schadler, inkubację prowadzono do 5 dni w temperatu- rze 37° C. Wzrost w hodowlach monitorowano co 24 godz. Z próbek, w których stwierdzono wzrost mikroorganizmów wykonywano prze- siew na pożywki stałe dla bakterii tlenowych i beztlenowych, odpowiednio: Columbia agar z dodatkiem 5% erytrocytów baranich oraz Schedler agar z dodatkiem 5% erytrocytów ba- ranich. Wyhodowane mikroorganizmy identy- fikowano z wykorzystaniem spektrometrii mas połączonej z jonizacją próbki poprzez desorp- cję laserem z matrycy i pomiarem czasu prze- lotu jonów (MALDI-TOF MS – matrix assisted laser desporption ionisation – time of flight mass spectrometry) na aparacie Vitek MS (bio- Mérieux) zgodnie z instrukcją producenta. _Wyniki Z posiewów próbek pochodzących z zębów zatrzymanych (grupa „O”) uzyskano wzrost we wszystkich (n = 15) posiewach. Z próbek pocho- dzących z zębów w stanie zgorzelinowego roz- padu miazgi (n=20) – grupa „Z” uzyskano wzrost bakterii w 95% badanych próbek. W obu grupach uzyskano wzrost bakterii tlenowych i beztleno- wych. Tylko 5% preparatów mielonych zębów przygotowanych w celu autotransplantacji, moż- na było uznać za czyste mikrobiologicznie. Ocena ilościowa mikroorganizmów nie była przeprowa- dzona jako zbędna, skoro miano bakterii wystar- czyło do ich wzrostu w warunkach in vitro, zbli- żonych do tkankowych. Występowanie bakterii (ocena jakościowa) w grupach „O” i „Z” przedstawiono na wykresach 1a i 1b. W grupie „O”, zębów zatrzymanych wyho- dowano 22 szczepy bakterii, należące do 9 gatun- ków. Bakterie te należały do rodzajów: Bacillus, Corynebacterium, Lactobacillus, Paenibacillus, Staphylococcus, Streptococcus. Na szczególną uwagę, zasługuje wyhodo- wanie w tej grupie bakterii z gatunku Bacillus cereus. Mikroorganizm ten odpowiedzialny jest głównie za zatrucia pokarmowe, ale jego udział w wywoływaniu zakażeń poza układem pokar-