laser_badania laser 22 3+4_2016 22 Zakres uszkodzeń termicznych oraz obszar tkanek skarbonizowanych w okolicy nacię- cia okazuje się być większy przy zastosowaniu wiązki lasera o długości fali 980 nm. Ponadto, obszar zniszczenia nabłonka (oderwanie tkanki łącznej podnabłonkowej) bocznie w stosunku do nacięcia jest większy w wyniku zastosowa- nia długości fali 980 nm. Wyniki badań histo- logicznych potwierdzają dostępne w literaturze opracowania dotyczące stosowania długości fal 980 nm. Naświetlenie próbek kości również spowo- dowało znacznie większą strefę karbonizacji i martwicy po użyciu długości fali 980 nm niż w przypadku 445 nm (980 nm przy mocy 2 W, cw; 445 nm przy mocy 2 W, cw; Ryc. 6). Podczas pracy światłem NIR następuje spalenie warstwy powierzchniowej oraz powstanie wyraźnej war- stwy skarbonizowanej, łączącej się z obszarem martwicy. W porównaniu z nacięciem wiązką 445 nm na skrawku tego samego preparatu, na jego powierzchni widoczny był wąski obszar karbonizacji z równie wąskim obszarem martwi- cy pod nim. _Badania hodowli komórek Lasery diodowe wywołują przede wszystkim efekty cieplne. Jednakże, w odniesieniu do dłu- gości fali 445 nm, dostępnych jest tylko kilka doniesień o działaniu promieniowania laserowe- go na poziomie komórkowym. Celem badania komórek w hodowlach in vitro było więc spraw- dzenie efektów interakcji tego promieniowania w porównaniu ze znanym działaniem podczer- wieni. W pierwszej kolejności należało zbadać, czy przebieg gojenia rany po zastosowaniu lasera o długości fali 445 nm oraz 980 nm różnił się od gojenia w wyniku działania mechanicznego. Co więcej, trzeba było także sprawdzić, czy promie- niowanie lasera powoduje uszkodzenie konkret- nej komórki.23 W celach zasymulowania działania lasera na tkankach miękkich jamy ustnej, laserem o długo- ści fali 445 nm i 980 nm i mocy 2 i 3 W w pracy ciągłej naświetlono jednowarstwową hodow- lę komórek linii HaCaT i Mg-63 na szkiełku na- krywkowym (Ryc. 7a-d). W celu zasymulowania nacięcia chirurgicznego wygenerowano wiązkę o określonej prędkości przenikania (3 mm/s) oraz odległości, jaką ma pokonać fala w jednowar- stwowej hodowli komórek (1 mm). Jako punkt odniesienia, końcówką nieaktywnego lasera wy- konano mechaniczne zranienie (Ryc. 7a-d). Po naświetleniu komórek, ich morfologię zo- brazowano poprzez barwienie H-E, a przebieg gojenia oceniono metodą mikroskopii optycznej. Występowanie zmian w cytoszkielecie i podwój- nej nici DNA po napromieniowaniu analizowano za pomocą barwienia luorescencyjnego (fallo- idyna, p-H2AX, Ryc. 7a-d). Stosując długość fali 445 nm, sprzężenie nastąpiło już przy użyciu mocy 2 W, podczas gdy przy 980 nm, do uzyska- nia tego efektu należało użyć mocy wyjściowej 3 W na pigmentację. Analiza obrazu z kamery termowizyjnej wykazała znacznie większy wzrost temperatury na jednowarstwowej powierzchni komórek naświetlanej falami o długości 445 nm (> 400° C) spowodowany większą absorpcją w komórkach w porównaniu z pracą fal 980 nm. Proces gojenia zmian w monowarstwie w przy- padku zastosowania obu długości fal jest porów- nywalny z gojeniem po urazie mechanicznym (Ryc. 7a-d). W przypadku żadnego z zastosowa- nych systemów laserowych nie zaobserwowano zwiększonego występowania uszkodzeń podwójnej helisy DNA.23 W przeciwieństwie do naświetlania UV, naświetlanie laserem o długości fali 445 nm i 890 nm nie zwiększyło ryzyka uszkodzenia DNA jako wskaźnika ryzyka genetycznego (Ryc. 7a–d). _Działanie antybakteryjne W wielu przypadkach klinicznych działanie antybakteryjne przypisuje się działaniu lasera o różnych długościach fal. Efekt ten wynika z działania temperaturowego oraz fotoche- micznego, znanego np. z antybakteryjnej terapii fotodynamicznej (aPDT). Efekt ten przypisywa- ny jest działaniu światła bliskiej podczerwieni już od wielu lat. Wyniki podstawowych badań medycznych potwierdziły, że światło niebieskie również ma działanie antybakteryjne.11 W rezul- tacie, laser o długość fali 445 nm stosowany w chirurgii ma ogromny potencjał do działania antybakteryjnego. Celem wykazania, czy działanie antybakte- ryjne niebieskiego światła lasera chirurgicznego było porównywalne z antybakteryjnym działa- niem promieniowania laserowego w podczer- wieni o długości fali 980 nm przeprowadzono badania porównawcze.24 W szczególności, na- leżało zbadać, czy odkażanie pola operacyjne- go bez stosowania działania termicznego jest w ogóle możliwe. By to sprawdzić, pożywkę agarową pokry- to bakteriami (E. faecalis i S. salivarius) i na-