Dental Tribune Édition Française | Novembre 2021 CONFÉRENCE À VENIR 13 SPÉCIAL ADF Approches innovantes en régénération pulpaire, cicatrisation de l’os irradié. L’IFRO fête ses 20 ans ! Responsables scientifiques : Martine Bonnaure-Mallet, Jacques-Olivier Pers Conférenciers : Jean-Christophe Farges | Anne-Gaëlle Bodard | Isabelle Fontanille-Descottes | Olivia Kérourédan | Xavier Coutel | Ihsène Taïhi-Nassif Recherche B27 | Mercredi 24 novembre | 14h00–17h00 Développement d’un hydrogel nanocomposite antibactérien pour la régénération de la pulpe dentaire humaine Bekhouche M,a, d Bolon M,a Charriaud F,a Lamrayah M,a Da Costa D,a, b Primard C,b Costantini A,a Pasdeloup M,a Gobert S,a Mallein-Gerin F,a Verrier B,a Ducret M,a, c, d Farges JCa, c, d a Laboratoire de biologie tissulaire et ingé- nierie thérapeutique UMR5305 CNRS/ université Lyon 1, Lyon, France. b Adjuvatis®, Lyon, France. c Hospices civils de Lyon, service de consul- tations et traitements dentaires, Lyon, France. d Faculté d’odontologie, université de Lyon, université Lyon 1, Lyon, France. Les procédures endodontiques régénéra- tives (PERs) à base d’hydrogel sont considé- rées comme des stratégies thérapeutiques très prometteuses pour reconstruire la pulpe dentaire (PD) dans les dents humaines dévitalisées. Cependant, la réussite du pro- cessus de régénération est limitée par les Microstructure de l’hydrogel de fibrine nanocom- posite observée en microscopie électronique à ba- layage. Des nanoparticules sont indiquées par les flèches rouges. Barre blanche = 10 μm. La fonctionnalisation d’un hydrogel de fibrine par des nanoparticules d’antibiotiques lui confère des propriétés antibactériennes qui n’ont pas d’effet délétère sur les cellules souches mésenchyma- teuses de la pulpe dentaire humaine. bactéries résiduelles qui peuvent persister dans l’espace endodontique, après l’étape de désinfection, et contaminer le biomatériau. L’objectif de ce travail était de développer un hydrogel de fibrine innovant incorpo- rant des nanoparticules (NPs) d’acide poly (L,D)-lactique (PLA) chargées en clindamy- cine (CLIN), pour conférer à l’hydrogel des propriétés antibactériennes. Les NPs de CLIN-PLA (CLIN-PLA-NPs) ont été synthéti- sées par une méthode de nanoprécipitation sans tensioactif, et leurs propriétés micro- physiques ont été évaluées par diffusion dy- namique de la lumière, mobilité électro- phorétique et microscopie électronique à balayage. Leur efficacité antimicrobienne a été évaluée sur Enterococcus fæcalis par la détermination de la concentration mini- male inhibitrice (CMI), et des concentra- tions minimales d’inhibition et d’éradica- tion du biofilm (MBIC et MBEC). Les proprié- tés antibactériennes de l’hydrogel nano- composite ont été vérifiées par des tests de diffusion en gélose. La distribution des NPs dans l’hydrogel et leur libération ont été évaluées en utilisant des PLA-NPs fluores- centes. La cytotoxicité des NPs a été évaluée sur des cellules souches mésenchymateuses de pulpe dentaire (DP-MSCs) incorporées dans l’hydrogel. La synthèse du collagène de type I a été étudiée après sept jours de culture par im- munohistochimie. Les CLIN-PLA-NPs syn- thétisées présentent une charge d’antibio- tique de 10 ± 2 μg par mg de polymère de PLA et une efficacité de piégeage de 43 ± 7 %. Le chargement de l’antibiotique n’affecte pas la taille, l’indice de polydispersité et le potentiel zêta des NPs. La CMI pour Enterococcus fæcalis est de 32 μg/mL. La MBIC50 et la MBEC50 sont res- pectivement de 4 et 16 μg/mL. Les CLIN-PLA- NPs sont distribuées de manière homogène dans l’ensemble de l’hydrogel. Les hydrogels chargés de CLIN-PLA-NPs inhibent claire- ment la croissance d’E. fæcalis. La viabilité des DP-MSCs et la synthèse du collagène de type I dans l’hydrogel de fi- brine ne sont pas affectées par les CLIN-PLA- NPs. En conclusion, l’incorporation de CLIN- PLA-NPs dans l’hydrogel de fibrine confère à ce dernier des propriétés antibactériennes et antibiofilms, sans affecter la viabilité et la fonction cellulaire. Cette formulation pour- rait contribuer à l’établissement d’un envi- ronnement aseptique propice à la recons- truction de la pulpe dentaire et, par consé- quent, pourrait être un outil précieux pour les PERs. Références – Development of an antibacterial nanocom- posite hydrogel for human dental pulp engi- neering. Bekhouche M, Bolon M, Charriaud F, Lamrayah M, Da Costa D, Primard C, Costan- tini A, Pasdeloup M, Gobert S, Mallein-Gerin F, Verrier B, Ducret M, Farges JC. J Mater Chem B. 2020 Sep 23;8(36):8422-8432. doi: 10.1039/ d0tb00989j. – Fibrin-based scaffolds for dental pulp regen- eration: from biology to nanotherapeutics. Ducret M, Costantini A, Gobert S, Farges JC, Bekhouche M. Eur Cell Mater. 2021 Jan 2;41:1- 14. doi: 10.22203/eCM Quelles perspectives pour la cicatrisation de l’os irradié ? Anne-Gaëlle Bodard et coll. Introduction La radiothérapie externe est une modali- té thérapeutique majeure en cancérologie de la tête et du cou. Elle entraîne néan- moins des effets indésirables à long terme, notamment des altérations osseuses. L’hy- povascularisation, l’hypoxie et la réduction du remodelage osseux favorisent le risque de survenue d’une ostéoradionécrose (ORN). De nombreuses propositions théra- peutiques existent pour la prise en charge de l’ORN (chirurgie, laser de basse énergie, oxygénothérapie hyperbare, protocole mé- dicamenteux Pentoclo, etc.), sans toutefois permettre une guérison de la majorité des cas. Aussi, dans les formes extensives, la prise en charge est chirurgicale et consiste en une ablation partielle de l’os concerné, impactant fortement la qualité de vie du patient. Hypothèses Nous avons souhaité, dans un premier temps, mettre au point un modèle d’irradia- tion mandibulaire chez l’animal, afin de dé- terminer la cinétique de cicatrisation de l’os irradié, puis, dans un second temps, évaluer les effets des ultrasons pulsés de basse in- tensité (LIPUS) sur la cicatrisation de l’os ir- radié. En effet, ils ont démontré leur intérêt dans la réparation osseuse en traumatolo- gie, et nous avons émis l’hypothèse qu’ils pourraient stimuler la cicatrisation de l’os irradié. Matériel et méthodes Trois groupes de lapins New Zealand white ont été étudiés : – un groupe contrôle (C) ; – un groupe irradié (R) ; – un groupe irradié et insonifié (RL). Le protocole d’irradiation (groupes R et RL) a consisté en cinq séances délivrant 8.5 Gy chacune, à raison d’une séance heb- domadaire. Immédiatement après la fin de la dernière séance d’irradiation, les ani- maux (tous les groupes) ont bénéficié de la création d’une néoalvéole standardisée, sous anesthésie générale. Puis le groupe RL a bénéficié de dix séances d’insonification, de 20 minutes chacune. Les sacrifices ont été échelonnés entre J0 et J42. Une analyse histologique et microra- diographique (microscanner) et de la micro- dureté a été effectuée pour chaque animal. Résultats D’un point de vue histologique, le défaut osseux était presque complètement réparé à J28 pour le groupe C, alors qu’il était com- blé par du tissu fibreux et du tissu imma- ture à J42 pour le groupe R. Au niveau du microscanner, la densité minérale osseuse, le rapport Bone Volume/ Trabecular volume, le Trabecular Number et le Trabecular Spacing étaient statistique- ment différents pour les groupes C et R. Concernant le groupe RL, les résultats étaient beaucoup plus hétérogènes, avec pour conséquence une absence de significa- tivité des différences observées. Toutefois, les animaux se nourrissaient mieux, et on notait en particulier aux phases précoces une amélioration du Trabecular Number. Discussion Le modèle animal d’irradiation proposé reproduit le fractionnement de la radiothé- rapie à visée thérapeutique chez l’humain (Zhang, 2010).1 Malgré quelques différences au niveau histologique, et une plus grande radiorésistance, il semblerait que le modèle d’irradiation mandibulaire chez le lapin, soit intéressant pour tester de nouvelles thérapeutiques. Concernant les LIPUS, les premiers résultats sont encourageants, mais à interpréter avec prudence du fait du nombre d’échantillons analysés et de l’hété- rogénéité des observations. Leur rôle est sans doute plutôt intéressant dans les phases précoces de la cicatrisation osseuse, avec un effet au niveau de la vascularisation (Zhou, 2016).2 Références 1 Zhang WB, Zheng LW, Chua D, et al. Bone re- generation after radiotherapy in an animal model. J Oral Maxillofac Surg 2010;68:2802-9. 2 Zhou Z, Lang M, Fan W, Dong X, Zhu L, Xiao J, Wang Y. Prevention of osteoradionecrosis of the jaws by low-intensity ultrasound in the dog model. Int J Oral Maxillofac Surg 2016; 45:1170-76. Traitement de l’obésité et diabète : impact de la parodontite sévère Isabelle Fontanille,a, b Alexandre Courtet,a Alexis Van Straaten,c Anne-Sophie Jannot,c, d, e Philippe Bouchard,a, f Sébastien Czernichowg a Département de parodontologie, U.F.R. d’odontologie, université de Paris, hôpital Rothschild AP-HP, Paris, France. b Service d’odontologie, Evreux, France. c Assistance publique-hôpitaux de Paris (AP-HP), service d’informatique médicale, biostatistiques et santé publique, hôpital européen Georges Pompidou, Paris, France d Université de Paris, Paris, France.