Please activate JavaScript!
Please install Adobe Flash Player, click here for download

Dental Tribune Russian Edition

Для контроля 10 животным ввели хлорид натрия (3-я группа) и еще 20 животных оперировали для форми- рования подкожных карманов без последующей подсадки биоматериа- ла. На 3, 10, 15, 30 и 60-й день живот- ных умерщвляли с помощью избы- точной дозы кетамина и ксилазина, в соответствии с ранее описанным ме- тодом заменитель кости извлекали и подготавливали к гистологическому и гистоморфометрическому анализу. Обработка тканей Извлеченные образцы фиксирова- ли в растворе формалина 4%, разре- зали на части толщиной 4 мм, де- кальцифицировали, высушивали в спирте и погружали в парафин. После этого образцы с помощью микротома рассекали на фрагменты толщиной 4 мкм и окрашивали пер- вый фрагмент гематоксин-эозином, а второй – тартат-резистентной ки- слой фосфатазой (TRAP) для выявле- ния остеокластоподобных клеток. Третий и четвертый срезы использо- вали для иммунохимического окра- шивания с помощью антитела ED-1 (к клеткам моноцитарно-макрофа- говой линии). Пятый срез окрашива- ли средством Movat’s pentachrome для визуализации врастания CT в ло- же имплантата, а седьмой срез – кра- сителем Von Kossa/Safranin-O для вы- явления кальция и фосфата кальция. Гистологическое и гистоморфометрическое исследование После окрашивания независимые эксперты изучали срезы с помощью диагностического микроскопа (Ni- kon, Токио, Япония); гистоморфо- метрический анализ взаимодействия ткани и биоматериала в пределах ло- жа и периимплантных тканей прове- ли с помощью программы NIS-Ele- ments (Nikon, Токио, Япония). Опре- делили общее количество сосудов и их площадь на каждом срезе, а также соотношение последней с общей площадью имплантации. Таким об- разом, определяли среднее количе- ство сосудов на 1 мм2 и среднюю об- щую площадь сосудов в каждый мо- мент времени. Результаты количе- ственного анализа представили в ви- де среднего значения ± стандартное отклонение; различия считали значимыми при p<0,05 и высоко значимыми при p<0,01. Результаты Все животные во всех группах пе- ренесли хирургическую процедуру и период послеоперационных на- блюдений без осложнений. Призна- ки сильной воспалительной реак- ции отсутствовали. Реакция ткани на гранулы b-TCP Начиная с 3-го дня, в группе твер- дых гранул b-TCP материал вызывал проникновение фагоцитов, макрофа- гов и волокон CT, что привело к обра- зованию плохо васкуляризированной грануляционной ткани с высоким со- держанием волокон и фибробластов, которая целиком заполнила ложе к 15-му дню. На 30 и 60-й день сохрани- лись лишь незначительные остатки гранул заменителя кости. Васкуляри- зация ложа оставалась низкой и с точ- ки зрения описанных параметров не имела значимых отличий от показа- телей двух других контрольных групп (рис. 7, а –г; рис. 8, а, б). Реакция ткани на пастообразный раствор b-TCP В случае группы трехфазного па- стообразного b-TCP материал на 3-й день представлял собой компакт- ную структуру, причем его можно было четко разделить на плотный внешний слой и внутреннее ядро. Большое число фагоцитов и лимфо- цитов, некоторое количество плаз- моцитов и эозинофилов начали проникать во внешний слой мате- риала, не затрагивая материал внут- ри. Ввиду этого в середине ложа не обнаружили ни сосудов, ни CT или органических структур (рис. 1, a–в). На 10-й день такое разграничение биоматериала все еще присутство- вало. Внешний слой содержал ак- тивную грануляционную ткань с по- вышенным образованием новых со- судов, в то время как внутреннее яд- ро практически не изменилось с 3- го дня и все еще содержало лишь не- значительное количество мононук- леаров (рис. 2, a–д). На 15-й день разложение внеш- ней структуры продолжалось. Гра- нуляционная ткань, сформировав- шаяся вокруг биоматериала, отлича- лась превосходной васкуляризаци- ей и содержала больше многоядер- ных гигантских клеток, чем на 10-й день. По сравнению с внешними областями во внутреннем ядре био- материала по-прежнему содержа- лось меньше волокон CT, мононук- леаров, а особенно – многоядерных клеток (рис. 3, a–г). Полная интеграция внешней области и внутренней области (IR) биоматериала произошла к 30-му дню. В хорошо васкуляризирован- ной грануляционной ткани с боль- шим содержанием волокна пре- обладали TRAP-положительные Russian EditionДостижения индустрии4 Рис. 1. Реакция тканей на трехфазный заменитель кости на 3-й день после имплантации: a – общий вид заменителя кости, размещенного в пределах CT (EP – эпи- дермис; OR – внешняя богатая клетками область; IR; окрашивание гематоксин-эозином, общий вид; ув. 100); б – инфильтрация мононуклеаров во внешнюю область (окрашивание Movat’s pentachrome, ув. 400; деление масштабной линейки 100 мкм); в – IR, в которой расположены гранулы b-TCP (TCP; звездочки; окрашива- ние Movat’s pentachrome, ув. 100; деление масштабной линейки 100 мкм). Рис. 4. Реакция тканей на трехфазный заменитель кости на 30-й день после имплантации: a – общий вид области имплантации; внутренний круг с немногочис- ленными остатками заменителя кости (звездочки – грануляционная ткань; окрашивание гематкосин-эозином, общий вид, ув. 100); б – бывшая внешняя область, трансформировавшаяся в грануляционную ткань (красные стрелки – сосуды; треугольные указатели – многоядерные гигантские клетки; окрашивание Movat’s pentachrome, ув. 400; деление масштабной линейки 100 мкм); в – на дифференциальную экспрессию TRAP в данный момент времени указывают TRAP-отрицатель- ные и TRAP-положительные многоядерные гигантские клетки (черные треугольные указатели – TRAP-отрицательные многоядерные гигантские клетки; красные треугольные указатели – TRAP-положительные многоядерные гигантские клетки; окрашивание TRAP, ув. 200; деление масштабной линейки 100 мкм). Рис. 3. Реакция тканей на трехфазный заменитель кости на 15-й день после имплантации: a – общий вид материала, имплантированного в пределах подкожной CT (окрашивание гематоксин-эозином, общий вид, ув. 100); б – внешняя область (OR, двухсторонняя стрелка) с уникальной грануляционной тканью (красные стрелки – сосуды; треугольные указатели – многоядерные гигантские клетки; окрашивание гематоксин-эозином, ув. 200; деление масштабной линейки 100 мкм); в – активность TRAP в многоядерных гигантских клетках (красные треугольные указатели; окрашивание TRAP, ув. 200; деление масштабной линейки 100 мкм); г – состав IR имплантированного материала (треугольные указатели – многоядерные гигантские клетки; красные стрелки – сосуды; черные стрелки – мононуклеа- ры; окрашивание Movat’s pentachrome, ув. 400; деление масштабной линейки 100 мкм). Рис. 2. Реакция тканей на трехфазный заменитель кости на 10-й день после имплантации: a – общий вид области имплантации (окрашивание гематоксин-эозином, общий вид, ув. 100); б – внешняя область (OR, двухсторонняя стрелка), заметно отличающаяся от IR (красные стрелки – сосуды; треугольные указатели – гигантские клетки; окрашивание гематоксин-эозином, ув. 200; деление масштаб- ной линейки 100 мкм); в – врастание CT во внешнюю область имплантированного пастообразного заменителя кости (красные стрелки – сосуды; красные звездочки – раствор полимера; окрашивание Mo- vat’s pentachrome, ув. 400; деление масштабной линейки 100 мкм); г – многоядерные гигантские клетки внутри внешней области; красные треугольные указатели – TRAP-положительные многоядерные ги- гантские клетки; черные треугольные указатели – гигантские клетки без активности TRAP; окрашивание TRAP, ув. 400; деление масштабной линейки 100 мкм); д – IR ложа (стрелки – мононуклеары; звез- дочки – водный раствор полимера; окрашивание Movat’s pentachrome, ув. 200 раз; деление масштабной линейки 100 мкм). DT стр. 5 а б в а б в г а б в г д а б в

Pages Overview