Dental Tribune Édition Française

conférence à venir 5ADF Paris 2013 · show preview et PiT1, et une absence d’expression de Npt1-2a-2c et PiT2. Si nos données laissent ainsi supposer que les transporteurs de Pi d’intérêt au niveau dentaire sont Npt2b et PiT1,cellesdelalittératurelaissentpenser que PiT2 l’est aussi. Une approche par microdissection laser combinée à la RT- PCRestencourspourcomplétercesrésul- tats. En conclusion, nos résultats identifient Npt2b principalement mais aussi PiT1 et probablement PiT2 comme transporteurs dePimajoritaireslorsdesprocessusdedé- veloppement et de minéralisation den- taire. Leurs rôles fonctionnels respectifs sont en cours d’analyse par des approches d’invalidation in vitro/ex vivo puis in vivo. Profil immunitaire dans la parodontite agressive Surmenian J.1,2 ,DurandA.1 ,Mahler P.2 , Rou- leau M.1 ,WakkachA.1 ,Blin-Wakkach C.1 1:CNRSFRE3472,LP2M,hôpitall’Archet1, Nice 2:pôleodontologie,CHUNice,hôpitalSt Roch,Nice Les parodontites chronique (PC) et agressive (PA) sont caractérisées par une hyperactivation du système immunitaire associéeàunedestructionosseusecondui- sant à des pertes dentaires. Elles diffèrent notamentparlasévéritéetlarapiditédela destruction osseuse, plus importantes dans la PA. Malgré le lien reconnu entre systèmeimmunitaireetperteosseuse,peu dedonnéessontdisponiblesconcernantle profil immunitaire dans la PA, contraire- mentàlaPC.Notreprojetvisedoncàcarac- tériser les cellules immunitaires infiltrant le site inflammatoire chez les patients at- teints de PA afin d’identifer des popula- tions immunitaires potentiellement impli- quées dans la perte osseuse et d’analyser leur mécanisme d’action. Les résultats ap- porteront de nouvelles données sur la pa- thogenèse de la PA et sur les mécanismes de la perte osseuse rapide qui lui est asso- ciée.Aterme,ilspourrontpermettrel’iden- tification de nouvelles cibles thérapeu- tiques ou de définir des populations cellu- laires utilisables comme marqueurs pro- nostics de l’évolution de la maladie. Protéines de l’émail et régulation de la résorption osseuse des mâchoires Amélie E COUDERT,Jaime JACQUES, Julianne ISAAC,Dominique HOTTON, Vianney DESCROIX,Ariane BERDAL Les protéines de l’émail sont les consti- tuants essentiels de la matrice extracellu- laire minéralisée constitutive de l’émail. Sous forme d’extraits dentaires, elles sont utilisées en clinique notamment pour le traitement des défauts parodontaux grâce à des propriétés régénératrices. En plus d’être sécrétées par les améloblastes, cer- taines protéines de l’émail ont été décrites commeproduitesparlesostéoblastes.Une lignée ostéoblastique dérivée d’ostéosar- comehumainaétéutiliséeafindedévelop- perlesoutilsnécessairesàl’analysedesef- fetsdecesprotéinesdel’émailsurlesostéo- clastes et sur leur fonction de résorption. De plus, des microdissections de tissus os- seux murins ont été criblées. Ces modèles nousontpermisdepréciserleniveaud’ex- pressionendogènedesprotéinesdel’émail par les cellules ostéoblastiques et de déve- lopper tout un panel d’amorces de qPCR afin d’analyser l’expression des différents peptides issus d’épissages alternatifs. Les donnéesobtenuessuggèrentquecespepti- des sont susceptibles de fonctionner de fa- çon autocrine dans le tissu osseux. Cellules souches pulpaires, sérotonine,minéralisation dentaire et osseuse Dimitrova-Nakov Sasha La sérotonine (5-HT) joue un rôle tro- phique au cours du développement em- bryonnaire, en particulier dans la forma- tion du squelette et la morphogenèse cra- niofaciale. Le récepteur sérotoninergique 5-HT2B (5-HT2BR) est exprimé par les cel- lules dérivées de la crête neurale et du mésoderme. Le traitement d’embryons de mammifèrespardesantagonistespharma- cologiques des récepteurs de la famille 5- HT2 induit des malformations craniofacia- les et un retard de croissance. De plus, les souris 5-HT2BR-/- sont osteopéniques et présentent des anomalies craniofaciales. Undenosobjectifsaétéd’étudierlerôle du5-HT2BRdanslaformationetlaminéra- lisationdel’émaildentaireenexploitantles souris 5-HT2BR-/-. Des analyses qualitati- vesetquantitativesdesdentsdesourisont été réalisées par microscopie électronique etimagerietri-dimensionnelleàhauteréso- lution après acquisition par microscanner aux rayons X. Les incisives et molaires des souris 5-HT2BR-/- présentent des altéra- tions de l’émail se traduisant par des dé- fauts de structure et de densité minérale. Une faible augmentation du volume pul- pairedessouris5-HT2BR-/-reflèteaussiun défaut de dentinogenèse. Ces données in- troduisent ce récepteur comme un nouvel acteur du développement de la dent. Un deuxième axe vise à caractériser les propriétés intrinsèques des cellules sou- ches pulpaires. Ces progéniteurs pulpaires sont essentiels à la maintenance de l’ho- méostasiedeladentetàlaformationdeden- tineréparatriceencasdelésions.Lesméca- nismes qui sous-tendent les capacités régé- nératrices de ces progéniteurs pulpaires restentencoreinconnus.L’établissementde lignées cellulaires clonales à partir de la pulpedemolairesdesouris(ED18)apermis demontrerquedifférentstypesdeprogéni- teurscoexistentdanslapulpedentaire.Cer- tains présentent les propriétés de cellules souchesmésodermiquesmultipotentestan- disqued’autresontdespropriétésrestrein- tes au programme odontogénique. Chaque clone est capable de contribuer à la forma- tiondenéodentineaprèsimplantationdans l’incisive de souris ou la molaire de rat. Nos résultats montrent qu’en absence de toute moléculebiotransporteur,l’implantationde cellules souches pulpaires favorise une ré- paration de la dent après lésion tout en pré- servantlavitalitédelapulpe. Au vue du rôle de la 5-HT, via ses récep- teurs, dans la migration des cellules déri- vées des crêtes neurales, à l’origine du germe dentaire, et dans la morphogénèse craniofaciale, nous avons exploité les li- gnées pulpaires stables et homogènes pourrechercherpardesapprochesbiochi- miques et pharmacologiques la présence de5-HTetdesfonctionsassociées(métabo- lisme, transport, stockage) à ce neuromé- diateur.Nosrésultatsmontrentquelescel- lules souches pulpaires possèdent l’en- semble des fonctions sérotoninergiques ainsiqu’unrépertoirebiendéfiniderécep- teurs 5-HT. Ces travaux apportent un nou- vel éclairage sur les propriétés intrin- sèquesdescellulessouchespulpairesetle rôle de la signalisation 5-HT dans l’ho- méostasie de la dent avec en perspective lesthérapiescellulairesenbiodentisterie. Reconstruction faciale : Evaluation du potentiel ostéogénique du Poly- Ether-Ether-Kétone (PEEK),fonc- tionnalisé par des cellules souches dentaires Panayotov I.V.1 ,Collart-Dutilleul P.Y.1 , Martin M.2,3 ,Yachouh J.1 ,Margerit J.1 , Vladimirov B.4 ,Gergely C.2,3 ,Cuisinier F.J.G.1 1LaboratoireEA4203deBiologie,Santéet Nano-science, UFR d’Odontologie, UM1 France 2LaboratoireCharlesCoulombUMR5221, F-34095, UM2, France 3 CNRS, Laboratoire Charles Coulomb UMR 5221, F-34095, Montpellier, France 4 Département de la chirurgie maxillo-fa- ciale, Université de médicine - Plovdiv, Bulgarie Introduction : Le Poly-Éther-Éther-Kétone (PEEK) est unpolymèreutilisépourlareconstruction osseuse dont les propriétés bioméca- niques permettent la reconstruction du massif faciale. Le but de ce travail est de proposer une méthode de dépôt par spray des films de multicouches de polyélectrolytes (MPE) formés par la poly-l-lysine (PLL) et de l’a- cide polyglutamique (PGA)) ainsi que des polyélectrolytes naturels (collagène et ca- séine).Cefilmdevantremplirlerôled’une couche d’adhésion pour des cellules pul- paires, elles aussi déposées par spray. Nousavonsévaluél’adhésion,laproliféra- tion et la différentiation ostéoblastique de ces cellules sur la surface du PEEK. Matériel et méthodes : Cinq doubles couches de PLL et de PGA (0,5 mg/ml en HEPES pH 7,4) se terminant parunecouchedePLL(PLL-PGA)5-PLL)ont déposés par spray en utilisant des flacons à usage unique. Les MPE ont ensuite été soumissesàuneirradiation parUV suivie d’une étape de séchage et de réhydrata- tion. Le collagène ou la caséine ont été dé- posé sur des MPEs se terminant par PGA (PLL-PGA)5). Les MPEs ont été caractérisées par la Microscopie de force atomique (AFM) et par mesure de l’angle de contact. Lescellulespulpaireshumainesprimai- resontétédéposéesparspraysurcessurfa- ces (groupe de contrôle : PEEK non traité). LecaractèresouchedesDPSCaétécontrôlé parcytométrieenfluxpourl’expressionde marqueursmembranaires(CD90,CD146et c-Kit). L’adhésion et la prolifération cellu- laire sur les surfaces de PEEK ont été étu- diées à 1, 3 et 8 jours après dépôt. Le suivi de la différenciation osseuse des DPSC a été fait en milieu ostéo-induc- teur (15% de Sérum de veau fœtal (SVF); dexaméthasone et glycérophosphate) pendant 21 jours. Pour déterminer le de- grédeminéralisationdelamatricel’étude histologiqueaétécombinéeaveclamicro- scopie électronique à transmission (MET). Résultats et discussion: L’étude en AFM des surfaces démontre des changements de la structure, de l’ho- mogénéitéetdelarugositédesMEPs.L’hy- drophobicité de la surface du PEEK dimi- nuejusqu’à60°avecladépositiondespre- mières 5 double couches de PLL/PGA. La prolifération cellulaire sur le PEEK recou- vert de PEM: PLL-PGA5-caséine était plus élevéequecellesurlasurfacecontrôle.La formationd’unematriceextracellulaireet laminéralisationdesPEMsontétévisuali- sées sur les coupes histologiques. Une orientation des cristaux autour des cellu- les et des cristaux intracellulaires ont été observés sur les images de MET. Conclusion : Nousavonsfonctionnalisélasurfacede PEEK avec des revêtements de MPEs, des protéines et des cellules souches pulpai- res. L’application de cette méthode in vivo sera la prochaine étape de nos travaux. Références: 1. Meningaud, J. P.; Spahn, F.; Donsimoni, J. M.,[Aftertitanium,peek?].Revuedestoma- tologie et de chirurgie maxillo-faciale 2012, 113, (5), 408-11. 2. Bahoric A., H. A. R., Clarke H.M., Zuker R.M.,Aerosolvehiclefordeliveryofepider- malcells-aninvitrostudy.CanJPlastSurg 1997, (5), 153–156. Microscopieélectroniqueàbalayagedescellulespul- paires sur la surface du PEEK A) surface de PEEK-(PLL- PGA)5-caséine/CaP  : prolifération cellulaire 8 jours après la déposition des cellules par spray ; PEEK-(PLL- PGA)5-caséine/CaP : différentiation cellulaire 21 jours après la déposition des cellules par spray.